脱色摇床,生物科研狗必备技能之~Western Blot

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脱色摇床,生物科研狗必备技能之~Western Blot

2023-03-30 20:55| 来源: 网络整理| 查看: 265

导读 这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。Western 使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的...

这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列

的特异性试剂作为探针检测之。Western 使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋

白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混

合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。

生物科研狗必备技能之~Western Blot

仪器: 高压锅、玻璃匀浆器、高速离心机、分光光度仪、—20℃低温冰箱、垂直板电泳转

移装置、恒温水浴摇床、多用脱色摇床。

试剂: 单去污剂裂解液、0.01mol/L PBS (pH7.3)、10%分离胶、4%浓缩校、G250 考马斯

亮蓝溶液、0.15mol/L NaCl 溶液、2X(5X)SDS 上样缓冲液、电泳缓冲液、转移缓冲液、

10X 丽春红染液、封闭液、TBST、TBS、洗脱抗体缓冲液、显影液、定影液、抗体、发光液。

杂品与耗材: 各种规格的吸头、离心管和加样器;各种规格的烧杯、量筒和平皿等玻璃材;

硝酸纤维素膜,乳胶手套,保鲜膜,搪瓷盘(>20×20cm),X-光片夹,X-光片,玻棒长短

各一根,计时器,吸水纸。

生物科研狗必备技能之~Western Blot

western blot 主要试剂的配方:

1. 5×电泳缓冲液配方(1L)

Tris-Base 15.1 g

甘氨酸(Glycine) 94g

SDS 5 g

注意事项:

a.加水时应尽量避免气泡的产生,否则会造成过多SDS的损耗。

b.配制好的溶液放于4度冰箱保存,使用时用纯水稀释至1×使用。

2. 1×转膜液配方(1L)

甘氨酸(Glycine) 2.9 g

Tris-Base 5.8 g

SDS 0.37 g

甲醇 200 mL

注意事项:

a.加入适量的纯水,用磁力转子将各组分溶解后加入甲醇溶液,最后用纯水定容至1L(甲醇气

味大,通风厨内配制,并注意戴口罩)。

b.加水时应尽量避免气泡的产生,否则会造成过多SDS的损耗。

3. 10×TBS配方(1L)

Tris-Base 24.2 g

NaCl 80 g

注意事项:

a.加入适量的纯水溶解各组分后,使用浓盐酸或浓氢氧化钠溶液调节溶液的PH至7.6(一般溶

解后溶液是偏碱的,所以选用浓盐酸调节PH至7.6即可)。

b.使用PH计调节溶液的PH前,要按照说明书校准PH计。

c.PH调节至7.6后,用纯水定容至1L,使用时稀释10倍至1×使用。

d.配制TBST时,在1×TBS中按照1:1000的比例加入吐温20充分混匀即可。

4. 30%丙烯酰胺单体储存液配方(100ml)

丙烯酰胺(Acrylamide) 29 g

N,N`-亚甲双丙烯酰胺(N,N`-Methylene Bisacrylamide) 1g

注意事项:

a. 将各组分溶于总体积为60ml的纯水中,加热至37℃完全溶解,用纯水定容至100ml。

b. 用装0.45µm膜的滤器过滤,置于棕色瓶中保存于4℃冰箱保存。

c. 丙烯酰胺有神经毒性,操作时戴手套,并注意不要造成实验台面等的污染。

5. 上液(1M Tris-HCl PH=6.8)配方(50ml)

Tris-Base 6.057 g

三蒸水 40 mL

注意事项:用浓盐酸调节PH至6.8,再用三蒸水定容至50ml,4℃冰箱保存。

6. 下液(1M Tris-HCl, pH8.8 )(50ml)

Tris-Base 9.08 g

三蒸水 40 mL

注意事项:用浓盐酸调节PH至8.8,再用三蒸水定容至50ml,4℃冰箱保存。

Western Blot 主要流程:

1. 蛋白样品的提取

1.1 常用裂解液及其特点

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1.2 蛋白质提取方法

(1) RIPA强裂解法:

a. 取适量胰酶消化细胞(针对对贴壁细胞,悬浮细胞可省略此步),收取细胞,PBS洗两遍,

600g离心5min,尽量去除PBS,向细胞沉淀中加入适量的预加了蛋白酶抑制剂PMSF的RIPA

强裂解液(80ul——200ul不等,根据自己细胞量的多少定)。

b. 冰上裂解40min,每5min剧烈涡旋一次。

c. 充分裂解后,14000rpm,4℃离心15min,将上清转至另一预冷的EP管中(不要吸到管底的沉淀)。

注意事项:

a. 整个过程尽量在冰上操作,因为蛋白在常温降解速度很快,而在冰上则能显著的减慢这一过程。

b. PMSF有毒,注意戴手套,并注意不要造成实验台面等的污染。

(2)SDS煮沸法(此方法对Caspase家族切割条带具有特效)

a. 收取细胞,PBS洗两遍,600g离心5min,尽量去除PBS。

b. 向细胞沉淀中加入适量的预加了蛋白酶抑制剂PMSF的SDS裂解液(80ul—200ul不等,根

据自己细胞量的多少定)。

c. 将EP管放在加热器上95-100℃加热20min以上,加热至样品中的核酸粘稠物(细胞内核酸)完全溶解为止。

d. 充分裂解后,14000rpm,4℃离心15min,将上清转至另一预冷的EP管中(不要吸到管底的沉淀)。

注意事项:

a. 由于加热的温度很高为95℃,煮沸的全过程中,不要离开蛋白样品,防止EP管炸开而损失

蛋白样品,甚至蛋白样品被蒸干。具体技巧与方法:放物体压住EP管,待加热时间快结束时,

停止加热,冷却到一定时间,轻轻拿开物体,轻轻拿出EP管。

b. 尽快将核酸粘稠物煮化,缩短提取蛋白时间。具体技巧与方法:加热前适度涡旋,加热过程中用剪去尖端的枪头吹打样品。

c. 提取的蛋白样品置于-20℃保存。

(3)细胞刮法(针对贴壁细胞)

a. 倒掉培养基,PBS洗培养皿2次。

b. 吸尽残留的PBS,加入预加了PMSF的SDS裂解液50-500Ul,迅速用细胞刮将细胞刮下,并将

裂解后的细胞转移到EP管中,其他步骤同SDS煮沸法。

注意事项:整个过程尽量在冰上操作以减慢蛋白的降解。

2. 蛋白样品的定量

本实验室采用BCA法测定蛋白质浓度,具体步骤:

a. 将各蛋白样品稀释20倍(根据自己蛋白样品的浓度可加大稀释倍数)至总体积为40ul或以

上,以供每个样品3个复孔。

b. 将蛋白样品和蛋白标准品加入96孔板中,每孔10ul,每个样品3个复孔。

c. 配制显色液,充分混匀,加入96孔板,每孔100ul。

d. 37℃孵育30min,酶标仪检测吸光度。

注意事项:

a. 尽量将样品加在96孔板的中间位置,避免酶标仪检测时的边缘效应。

b. 加入样品和显色液的过程中尽量避免气泡的产生。

c. 选用精确度高的移液枪,尽量使用进口的枪头。

3. SDS聚丙烯酰胺凝胶的配制

3.1 不同浓度胶的最佳分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围

6%胶 50-150kD

8%胶 30-90kD

10%胶 20-80kD

12%胶 12-60kD

15%胶 10-40kD

3.2 不同浓度胶的配制

成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)

6%胶 5ml 10ml 15ml 20ml 30ml 50ml

蒸馏水 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0

30%Acr-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0

1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0

10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.024 0.04

成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)

8%胶 5ml 10ml 15ml 20ml 30ml 50ml

蒸馏水 1.7 3.3 5 6.7 10.0 16.7

30%Acr-Bis(29:1) 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3

1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0

10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.018 0.03

成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)

10%胶 5ml 10ml 15ml 20ml 30ml 50ml

蒸馏水 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3

30%Acr-Bis(29:1) 1.7 3.3 5.0 6.7 10.0 16.7

1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0

10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02

成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)

12%胶 5ml 10ml 15ml 20ml 30ml 50ml

蒸馏水 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0

30%Acr-Bis(29:1) 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0

1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0

10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02

成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)

15%胶 5ml 10ml 15ml 20ml 30ml 50ml

蒸馏水 0.5 1.0 1.5 2.0 3.0 5.0

30%Acr-Bis(29:1) 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 25.0

1M Tris, pH8.8 1.9 3.8 5.7 7.6 11.4 19.0

10%SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5

TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02

3.3 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称为堆积胶、上层胶)

成分 配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)

5%胶 2 3 4 6 8 10

蒸馏水 1.4 2.1 2.7 4.1 5.5 6.8

30%Acr-Bis(29:1) 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7

1M Tris, pH6.8 0.25 0.38 0.5 0.75 1.0 1.25

10%SDS 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1

10%过硫酸铵 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1

TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01

4. Western Blot主要步骤

4.1 样品制备(具体方法参见蛋白质提取方法)

进行Western杂交时还需设置内或外参照,通常用beta-actin和GAPDH。

注意事项:一般上样20~30 μg已足够,如待检蛋白为低丰度蛋白,可加大上样量至100μg,

但电泳条带易拖尾,可制备亚细胞组份浓缩目的蛋白或采用更敏感的检测方法。

4.2 电泳分离(参照SDS-PAGE电泳方法)

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注意事项:

a. 胶版都是精密的玻璃器材,使用时轻拿轻放,禁止将胶板放到烘箱烘烤。

b. 电泳槽和胶槽中的电泳液要充足,可以避免跑出"笑脸"和"哭脸"。

c. 根据实验者的样品数选择相应的泳道数,样品的两侧需加入蛋白marker,便于剪切目的蛋

白条带。剩余的泳道加入等体积的1×SDS填充,以平衡盐离子电压,这样可以防止蛋白条带跑

歪。两侧的蛋白marker可选择不同的用量,然后根据蛋白marker的深和浅区分点样的顺序。

d. Western Blot中使用过的任何器材、试剂、仪器,全部要放归原位/恢复到使用前的状态。

4.3 转膜

杂交膜的选择是决定Western blot成败的重要环节。应根据杂交方案、被转移蛋白的特性以及

分子大小等因素,选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。用于Western blot的膜主要有两种:

硝酸纤维素膜(NC) 和PVDF膜(基地目前使用)。NC膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物,

在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结

合在一起,但在非离子型的去污剂作用下,结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白

分子量大小,选择不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白的结合

就越牢固。通常用0.45μm和0.2μm两种规格的NC膜。大于20kD的蛋白可用0.45μm的膜,小

于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了,如用0.45μm的膜就会发生"Blowthrough"的现象。

PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高,非常适合于低分子量蛋白的检测。但

PVDF膜在使用之前必需分别用纯甲醇、纯水、转膜液浸泡饱和5min。

蛋白质常用的转移方法主要有两种:槽式湿转和半干转移。前者操作容易,转移效率高;而后

者适用于大胶的蛋白转移,所用缓冲液少。

操作步骤:

a. 将胶浸于转移缓冲液中平衡10min。如检测小分子蛋白,可省略此步,因小分子蛋白容易扩散出胶。

b. 依据胶的大小剪取膜和滤纸6片,放入转移缓冲液中平衡10min。

c. 装配转移三明治:海绵+3层滤纸+胶+膜+3层滤纸+海绵,每层放好后,用试管赶去气泡。

切记:胶放于负极面(黑色面)。

d. 将转移槽置于冰浴中,放入三明治(黑色面对黑色面),加转移缓冲液,插上电极,选择稳

流200mA,1-2h(根据分子量的大小决定电泳时间)。注意:应再次检查"三明治"和电极是

否装配正确,电源是否接通。

e. 转膜结束后,切断电源,取出杂交膜

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注意事项:

a. PVDF膜是比较贵重的试验用品,使用时要节约使用,根据胶的大小来裁剪PVDF膜。

b. 做"三明治"的过程中,膜与胶之间不能有气泡。

c. 活化PVDF膜要充分,若出现点点白斑,说明活化不充分,需要延长活化时间。

d. 转膜液可回收4次使用,回收次数过多影响实验结果。

e. 分子量大的蛋白需延长转膜时间,小分子量蛋白则可适当增加转膜液中甲醇的比例。

f. 转膜结束后,将膜与胶接触的一面标记为正面。

4.4 免疫杂交与显色

a. 用25 ml TBS 洗膜5min,室温,摇动。

b. 置膜于25 ml 封闭缓冲液中1h, 室温,摇动。

c. 15ml TBS/T洗3次(5 min/T)。

d. 加入合适稀释度的一抗,室温孵育1-2h(一抗无法回收)或 4°C过夜(一抗可回收多

次),缓慢摇动。

注意事项:

a. 一抗为贵重的实验用品,使用前必需确定所购买的抗体的生产商以及货号,再根据这些信息

登陆相应生产商的网页,详细查阅实验者即将使用一抗的用途(WB、IP、Flow、IF等)、一

抗(便于选择合适的二抗)、目的条带的分子量大小(便于根据蛋白marker剪切目的条

带)、一抗的特异性、一抗使用的稀释比例。掌握这些资料后方能开始下一步的试验。

b. 由于WB公用平台使用者多,使用频繁,贵重实验用品消耗很大,因此一抗的使用必须是

4°C孵育过夜,回收使用多次,孵育必须使用杂交袋,小PVDF膜需2-3ml抗体,大PVDF膜需

3-4ml抗体,特大膜需5ml抗体。

c. 回收的一抗必须做好详细的标记(包括稀释日期、抗体名称、稀释比例、抗体),便于

下次继续使用。

d. 一抗变质的判断:出现絮状沉淀物、两次以上无法显示出目的条带、存放5个月以上、室温放置超过1h。

e. 若一抗反复多次得不到目的条带,可以选择抗体公司技术部门;也可选择查阅相关文

献,文献应包含相同的细胞株,相同的目的蛋白。根据文献资料可选择文献报道公司的抗体产

品,若文献选择的抗体公司与本实验室相同,而实验者在确定自身试验方法正确的情况下,得

不到目的条带,可该公司技术部门申请退货。

4.5 15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。

4.6 加入合适稀释度的碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗,室温孵育

1h,缓慢摇动。

注意事项:

a. 二抗的使用也必须使用杂交袋孵育以节约抗体,可以不回收使用,用量原则与一抗相同。

b. 二抗使用的稀释比例必须严格按照说明书使用,目前实验室使用鼠二抗的稀释比例是1:

3000—10000,使用兔二抗的稀释比例是1 :5000—10000,使用羊二抗的稀释比例是

1 :10000以上,过低的稀释比例会造成过高的显影背景。

4.7 15 ml TBS/T洗3次(5 min/T)。

4.8 15 ml TBS洗1次。

4.9 蛋白检测(显色法或发光法,按相应试剂说明操作)。

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注意事项:

a. 显影液和定影液按照规章使用,切忌将二者弄混。

b. 胶片使用全过程严格避光,开灯前确保胶片盒盖好,确保胶片盒已放入黑色塑料袋,确保存

放胶片的纸箱已盖好。

c. 胶片的使用一般可根据实验者PCDF膜的大小裁剪为两片使用(切记避光操作),每次层叠

胶片数小于4张,一般1-2张胶片即可。

d. 根据不同目的条带荧光强度的不同,实验者需调整压片的时间,从1min—2h不等,甚至可

以压片一天后再显影,但必须做到良好的避光措施。

e. 显影时间不宜过长,新的显影液2min即可,旧显影液也不要超过4min,否则背景发黑。定

影时间可稍长,一般5min以上,以确保定影的效果。

f. 显影液、定影液15天更换一次。

g. 对于磷酸化蛋白的检测,尽量选用进口的发光液(Millipore发光液)。

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2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

ARABLAB DUBAI 2021

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

展会时间:2021年11月15-17日(一年一届)

展会地点:阿联酋·迪拜

展馆名称:阿联酋·迪拜世界贸易中心

主办单位:迪拜政府举办

组展单位:北京环晟世贸国际会展有限公司

展览介绍:

中东实验仪器、分析检测设备博览会(ARAB LAB)创办于1984年,是中东地区唯一的实验仪器及检测设备展览会。展会官方合作伙伴为迪拜生物科技园(Dubiotech: The Dubai Biotechnology and Research Park),Dubiotech由迪拜政府与迪拜保健城共同建设,其完善的基础设施及环境成功促进了该地区的生物工艺发展,并吸引了大批致力于研发、试验、生产、存储、销售及批发的医药公司进驻园内。ARAB LAB为实验室技术、生物科技和生命科学、高科技自动化实验室及数据处理等相关行业搭建了一个专业的贸易平台,为众多国际企业的决策者和终端买家的货源找寻及商贸接洽提供了绝佳场所。

该展是迪拜迄今为止筹备最早,配备最完善的专业实验仪器博览会,更因其作为迪拜唯一的实验及实验仪器用品展,而为业内所熟知,口碑载道。作为德国老牌的组委会,其实力非凡尚且不说,其办展的专一性,更曾一度被美国科学仪器设备与实验室家具国际协会(SEFA)列为全球推荐展会。近年来,随着迪拜当地政府,工商协会方面支持与投入的与日俱增,各路的争相报道更不绝于耳。

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

展商情况:

2019本次展会总参展商:1000+家,展会观众:23,476人,来自100+个国家。中国区总面积高达1056平,企业数达到90家以上也是所有外展中中国企业最多的,更有国内知名企业集体亮相,如济南海能,山东博科,青岛中科汉维,杭州奥盛,上海尤尼柯,江苏天瑞,大连石油,北京华科仪,北分瑞利,上海伟贞,江苏康健等知名企业。大部分观众来自海湾地区和非洲地区,包括:印度、巴基斯坦、伊朗、土耳其、斯里兰卡、埃及等国家,也有少数的欧洲及东南亚国家,如意大利、西班牙、俄罗斯、泰国、印尼等。

90%以上的参展商将会向同行业的公司推介这个展会

80%以上的参展商对这次展会总体感到非常的满意并表示继续参加

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

市场背景:

迪拜(Dubai) 位于阿拉伯半岛中部、阿拉伯湾岸,是海湾地区中心, 与南亚次大陆隔海相望,被誉为海湾的明珠。迪拜现任酋长是His Highness Sheikh Mohammed Bin Rashid Al Maktoum. 1966年迪拜石油的发现使得大批外国劳动力涌入迪拜,石油收入刺激了社会和经济的高速发展,建成了我们今日耳熟能详的特色迪拜。如今,在迪拜的外来人口来自202个国 家和地区。中国人很多,奉行自由经济政策。近20多年来,迪拜利用“石油美元”建成了一系列现代化配套基础设施。凭借这些设施和优越的地理位置,以及传统的转口贸易优势,迪拜大力发展非石油产业,经济、社会发展迅速,现已成为本地区最重要的贸易、交通运输、旅游和购物中心。

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

近十年来,该市场除其本身对科学仪器的稳定需求量,一直是中国商人迈向全球市场的低风险跳板。不仅因为其拥有辐射范围广泛的优越地理位置,“五十年免费地皮供外来企业投资;劳务自由;资金进出自由;保税区允许100%的外国人持股;低关税,大多数货物关税大约在5%”等颇具优势的贸易政策也使之成为中国商人开发市场和寻找国外代理的不二之选。

在中东地区,政府投入大量资金,用于研发新产品等相关项目工程,这些重点投资为生物工程、实验仪器、分析检测设备等行业带来了巨大商机。中东地区大批研究组织机构近年来的不断发展壮大,使这片区域在新建和翻新实验室,临床研究设备方面得到了很大提升,很好推动了石油化学、环境卫生、教育及企业一些主推开发项目的发展。

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

展会亮点:

NO.1 全球商机首选 — 在实验分析领域,得到业界广泛认可,增幅比率飙升 ;

NO.1 全球高峰论坛 — 在生物化工领域,巩固了国际地位 ;

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NO.1 全球研讨发展 — 在化工石油领域,深化严把质量标准关 。

2021第35届迪拜实验仪器设备展览会

展品范围:

通用分析仪器:

分光光度计 PH酸度计 极谱仪 定氮仪 测汞仪 氧分析仪 专用水分测定仪 色谱分析仪器 气相色谱. 液相色谱. 离子色谱. 制备液相. 光谱分析仪器 原子荧光. 近红外光. 激光拉曼. ICP光谱. 质谱 气质联用. 液质联用. 等离子体. 生物质谱 电化学分析仪器 自动电位. 电化学工. 电导率仪 电泳仪 元素分析仪 气体元素. 金属元素. 甲醛/氨. 测氡仪 显微镜 普通光学. 生物显微. 多功能显. 像分析. 样品处理设备 粉碎/研. 萃取设备 采样器 移液器 数据处理设备 工作站 处理机 实验室信.

行业专用仪器:

油品闪点测试仪 水质分析仪 离子检测仪 BOD(生化需氧量) 气体检测仪 定硫仪 量热仪(热量计) 气体发生器 空气发生. 氢气发生. 氮气发生. 环境水质/污水监测仪器 COD测定. 氨氮测定. 水质采样. 环境空气质量及废气监测 气体采样. 烟气分析. 粉尘测定. 农业和食品分析仪器 乳品分析. 农药残留 饮用酒分. 纤维测定.

实验仪器设备:

水浴锅 电子天平 玻璃反应釜 电动离心机 电热干燥箱 恒温振荡器 电动搅拌器 实验台/工作台 恒温设备 恒温槽 恒温水浴. 恒温金属. 冷却循环. 实验室用反应设备 高压反应. COD消解. 化学反应. 发酵罐 离心机 高速离心. 低速离心. 微量离心. 手掌型离. 净化/清洗/消毒 灭菌器 消毒机 臭氧机 超声波清

生化分析仪:

恒温培养箱 振荡培养箱 全温培养箱 PCR基因扩增仪 层析仪 脱色摇床 生物安全柜 培养箱设备 生化培养. CO2培养. 培养摇床 多功能培. 分子生物学仪器 试剂 脂肪/蛋. 氨基酸组. DNA合成. 细胞计数

临床检验仪器设备:

血气分析. 酶标仪 洗板机 电解质分. 生物工程设备 液氮罐 低温冰箱 发酵罐/ 收集器

医用耗材:

一次性医用包 医用导管 护创材料 医用胶带 医用消毒棉 注射及输赢器械 穿次针 麻醉针 医用包.医用导管 伤口敷料.护创材料 医用胶带.医用消毒片 医疗诊察.体温计.血压计.听诊器.医用显微设备.中医诊断仪器血液分析试纸.止血防粘材料.敷料护创材料.注射器.输液器.手术用品材料 医疗配件.光学仪器配件.电声诊断仪器.呼吸功能装置.光谱诊断设备

临床检验试剂类:

体外诊断试剂 快速诊断试剂 电解质试剂 血球试剂 血凝试剂 血型试剂盒 血脂试剂 生化试剂 化学发光试剂 干化学试纸 衣原体 冰毒检测试剂 蛋白检测试剂 传染病检测试剂 肿瘤标志物试剂 变态反应诊断试剂 人类基因检测试剂 免疫组化与人体组织细胞试剂 生物芯片 维生素测定试剂 细胞组织化学染色剂类 自身免疫诊断试剂 微生物学检验试剂等诊断试剂

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科研必备“武器”之生物摇床科研必备“武器”之生物摇床

仪器介绍

摇床(又称振荡器),是一种在化学和生物实验室中常用的用于搅拌溶液的装置。一个典型的摇床有一个可以由电动机驱动的水平震动面板。待搅拌的液体装在烧杯、广口瓶或锥形瓶中,然后将容器放置在面板上。有些情况中,溶液可以装在离心管中,然后放在托架上,再使用摇床进行搅拌。目前,摇床已经被磁力搅拌器广泛取代,但在某些情况中,摇床仍具有使用价值。

科研必备“武器”之生物摇床

仪器结构

生物摇床外观上主要有温度显示器、转速显示器、定时器、电源、震荡开关等构造,内部则有弹簧振荡器、循环风机等部件。不同类型的摇床还拥有不同的部件。

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工作原理

生物摇床主要由电容器和电感器组成的LC回路,通过电场能和磁场能的相互转换产生自由振荡。要维持振荡还要具有正反馈的放大电路。

由于正反馈的作用越来越强烈,导致到达一个暂稳态。暂稳态期间另一个三极管经电容逐步充电后导通或者截止,状态发生翻转后到达另一个暂稳态。这样周而复始形成振荡工作的原理。

科研必备“武器”之生物摇床

仪器特点

① 集恒温培养箱和摇床于一体、一机两用、投资少,占地小。

② 轨道偏心轮驱动机构,可实现振幅多级可调。

③ 三维偏心轮驱动机构,运转更加平稳自如。

④ 具有运行参数记忆功能,可避免繁琐操作。

⑤ 行参数加密锁定,避免人为误操作。

⑥ 交流感应电机驱动,宽调速、恒转矩、恒转数、无碳刷、长寿命、免保养。

常见分类

室温摇床:就是样品可以裸露在空气中的生物摇床,对温度没有特殊要求,工作温度就是环境温度,主要用来做样品的摇匀、混匀。

孵育摇床:是一种温度可控的孵育器和振荡器相结合的生化仪器,广泛应用于对温度和振荡频率有较高要求的细胞培养、发酵、杂交、生物化学及酶和细胞组织的研究等。可对微生物细胞与各类菌种运动和静态的培养。

恒温摇床:具有不锈钢万用夹具、数显控温、无级调速和良好的热循环功能,是一种多用途的生化器,是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研,教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备。

科研必备“武器”之生物摇床

应用领域

生物摇床广泛应用于生物反应化学反应、发酵、细菌培养以及细胞组织研究等。在化学、生物学、分子学、制药、食品、环保等各项研究领域均有广泛应用。如脱色、染色、显影、纤维素膜的处理、分子杂交、抗原一抗体的反应和细胞培养等。对温度、振荡频率、振幅有较高要求的细菌培养、发酵、杂交和生物化学反应及发酵、细胞组织研究等。

科研必备“武器”之生物摇床

相关品牌

生物摇床的品牌主要为艾本德(eppendorf),康宁(CORNING),伯乐(BIO-RAD),赛默飞(ThermoFisher),艾卡(IKA),托莫斯(TOMOS),莱伯特(Labnet),耐思(NEST)等等。这8个品牌拥有不同类型的生物摇床,用户可以根据自己科研的需求,选择合适的生物摇床。

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提问者:白鹭先生 脱色摇床


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